以細胞質(zhì)染色呈棕黃色或黃色為陽性，染色結果采用Image-pro6.0圖像分析軟件進行分析，高倍鏡(×400)下每張切片隨機選擇5個視野，測定吸光度值(A值)并取其平均值作為該切片的A值。Omi/HtrA2的胞內(nèi)轉位間接免疫熒光雙染色法，在激光共聚集顯微鏡下觀察。取制備好的10μm厚的冷凍切片，采用免疫組織化學法，嚴格按免疫組織化學試劑盒和線粒體染色試劑盒說明書操作。線粒體的染色為綠色熒光,Omi/HtrA2的染色為紅色熒光,分別用綠色及紅色通道掃描，后合成。以胞質(zhì)中線粒體綠色熒光與Omi/HtrA2紅色熒光重疊合成黃色為陰性細胞,代表Omi/HtrA2尚未發(fā)生胞內(nèi)轉位。反之，胞質(zhì)中紅色熒光與綠色熒光未發(fā)生重疊而相互分離為陽性細胞,代表Omi/HtrA2已經(jīng)發(fā)生胞內(nèi)轉位,隨機取多個視野計數(shù)共200個細胞中的陽性細胞,以其比例做統(tǒng)計分析。統(tǒng)計學處理采用SPSS 17.0軟件對其行單因素方差分析,結果用x珋±s表示,組間比較采用LSD法,P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。2結果2.1肺組織形態(tài)結構變化對照組早產(chǎn)鼠1 d、3 d、7 d肺組織未見病理改變,肺泡結構逐漸發(fā)育成熟。高氧組早產(chǎn)鼠高氧暴露1 d時,與對照組比較差異無統(tǒng)計學意義，高氧暴露3 d時,逐漸出現(xiàn)肺泡壁毛細血管充血擴張,肺泡腔及間質(zhì)內(nèi)有少量炎性滲出，高氧暴露7d時，肺損傷較嚴重，肺泡腔和間質(zhì)內(nèi)大量炎性細胞浸潤，肺泡間隔增厚，肺泡數(shù)目減少，且結構簡單化和囊泡化，間質(zhì)內(nèi)膠原樣物質(zhì)增生，部分肺組織可見肺泡萎縮和肺不張。與高氧組相比，二氮嗪組肺組織受損得到改善。