日本老年老熟无码,久久国产精品波多野结衣av,欧美艳星nikki激情办公室,永久免费无码网站在线观看

您好!歡迎訪問和元李記(上海)生物技術(shù)有限公司網(wǎng)站!
咨詢熱線

18616108315

當前位置:首頁 > 新聞中心 > 注意!使用ecL化學發(fā)光液一定要明白這幾點

注意!使用ecL化學發(fā)光液一定要明白這幾點

更新時間:2018-11-22      點擊次數(shù):9123
    ecL化學發(fā)光液的使用方法,執(zhí)行常規(guī)SDS-PAGE、轉(zhuǎn)膜、洗膜。注意用HRP標記lgG或用一抗-鏈親和素-生物素-HRP夾法。推薦將一抗?jié)舛认♂尩?.5ug/ml(0.05~1ug/ml均可)將二抗?jié)舛认♂尩?.02ug/mL(0.005~0.04ug/mL均可)后1次洗膜的同時,新鮮配制發(fā)光工作液:根據(jù)用量將兩種組份按1:1比例混合均勻,備用。注:1)短時間暴露于日光燈下不會損害該工作液,但為獲得佳結(jié)果,將此工作液保存在棕色瓶中,避免暴露于任何強光。
    取A液和B液一定要用不同的槍頭,工作液現(xiàn)配現(xiàn)用,室溫放置數(shù)小時后仍可使用但靈敏度略有降低。用平頭鑷取出膜,搭在濾紙上瀝干洗液,勿使膜*干燥。用移液器將工作液加到膜上(推薦150μl發(fā)光液/cm2膜),使之充分接觸。室溫孵育5分鐘,準備立即壓片曝光。用平頭鑷子夾起膜,膜的下緣輕輕接觸吸水紙,去除膜上多余的液體,留下少量工作液,不可讓膜*干燥。
    在X光膠片暗盒內(nèi)表面鋪一張面積大于膜的保鮮膜。將印跡膜貼在保鮮膜上,將保鮮膜折起來*包裹印跡膜,去除氣泡和皺褶,可剪去邊緣部多余的保鮮膜。用濾紙吸去多余的發(fā)光工作液。用膠帶將覆蓋印跡膜的保鮮膜固定在暗盒內(nèi),蛋白條帶面向上。在黑暗中將X感光膠片放置在包裹的保鮮膜上,根據(jù)蛋白濃度曝光適當時間(根據(jù)光強度需摸索曝光時間,一般30s-2min),顯影沖洗。注:根據(jù)經(jīng)驗,如果背景過高,可使用兩張X感光膠片同時壓片。
    ecL化學發(fā)光液的注意事項,步驟1~5可在日光燈下操作;但發(fā)光液曝露于強光下時間過久靈敏度可能略有降低,移到暗房操作可避免之。戴手套可以避免在膜上留下手印。長時間曝光或蛋白過量,將加深背景并使條帶強弱變化失去線性關(guān)系。曝光不足則條帶模糊。發(fā)光工作液孵育約3分鐘后膜上的條帶發(fā)光。強條帶發(fā)光在暗房中肉眼可見,低豐度蛋白條帶發(fā)光較弱甚至肉眼不可見但可使X光膠片曝光。不能簡單以肉眼觀察判斷條帶發(fā)光時間。肉眼不可見的熒光實際上可持續(xù)數(shù)小時并使X光膠片感光,因而弱帶可曝光1-10小時。如果曝光后條帶不佳,可用洗膜緩沖液洗膜,重新孵育二抗,然后重新用ECL發(fā)光和曝光。由于超敏發(fā)光液極其靈敏,強烈推薦大多數(shù)進口抗體起始濃度為一抗1:1000~1:4000,二抗1:2000~1:5000??贵w濃度過高將造成高背景或沒有條帶,導致失敗。某些保鮮膜包裹印跡膜時可能會淬滅熒光,應(yīng)選擇高質(zhì)量保鮮膜。使用肉眼可見的預(yù)染色蛋白Marker和熒光-放射自顯影曝光標簽可確定膠片上條帶的位置和大小。NaN3能抑制HRP活性,回收第二抗體應(yīng)避免使用NaN3,如必需使用勿超過0.01%。
微信咨詢
地址:上海市浦東新區(qū)紫萍路908弄 傳真:021-50724961
©2025 和元李記(上海)生物技術(shù)有限公司 版權(quán)所有 All Rights Reserved.  備案號:滬ICP備2023007219號-1
国产熟女一区二区三区| 精品无人区无码乱码av片国产| 无码人妻a片一区二区三区| 久久久久国色av免费观看| 黄页网站免费频道大全| 中文字幕AV无码免费一区| 久久9精品区-无套内射无码| 久久97精品久久久久久久不卡| 天天爽夜夜爽夜夜爽精品视频 | 国产精品乱码在线观看| 亚洲精品一区二区三区中文字幕| CAOPORN免费视频国产| 久久亚洲AV成人无码国产最大 | 精品亚洲成a人片在线观看| 国产一区二区三区不卡av| 亚洲高清成人av电影网站| 国产又黄又爽又色的免费视频| 亚洲AV无码成人精品区在线观看| 亚洲性色AV私人影院无码| 机机对机机的30分钟免费软件 | 无码国内精品人妻少妇蜜桃视频| 人妻无码一区二区三区| 国产精品久久久久久亚洲| 97久久国产亚洲精品超碰热| 国产精品露脸国语对白| 欧美人与动牲交xxxxbbbb| 精品国产一区二区三区久久影院| 少妇扒开双腿让我看个够| 免费看小12萝裸体视频国产| 欧美性猛交XXXX黑人| 一本久久a久久精品亚洲| 国产精品va在线观看无码| 国产麻豆一区二区三区精品视频| 国产97在线 | 日韩| 高清欧美性猛交xxxx黑人猛交| 亚洲加勒比久久88色综合| 亚洲精品中文字幕无码蜜桃| 国产农村妇女高潮乱叫| 国产成人无码aa精品一区| 亚洲AV无码一区二区二三区∝| 最近中文字幕免费mv视频7|