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  • 高分辨率熔解曲線(HRM)分析指南

    2016-10-10 HRM(HighResolutionMeltinganalysis,高分辨熔解曲線)同許多熒光PCR技術(shù)一樣,是利用特定dsDNA染料可以插入DNA雙鏈小溝中(PCR產(chǎn)物)的特性,通過(guò)實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)升溫過(guò)程中dsDNA解鏈,熒光染料脫落,熒光信號(hào)減弱或消失的過(guò)程,高分辨記錄熔解曲線,從而對(duì)樣品進(jìn)行檢測(cè)。HRM技術(shù)利用dsDNA的物理性質(zhì),準(zhǔn)確反映DNA序列堿基配對(duì)特異性與解鏈溫度變化的情況,無(wú)需使用特異性標(biāo)記探針,不受突變種類和突變位點(diǎn)的限制,具有高靈敏度和特異性、高通量、操作簡(jiǎn)單...
  • 培養(yǎng)細(xì)胞如何選擇適合自己實(shí)驗(yàn)的血清?快點(diǎn)擊進(jìn)來(lái)看看吧!

    2016-09-02 培養(yǎng)細(xì)胞如何選擇適合自己實(shí)驗(yàn)的血清?快點(diǎn)擊進(jìn)來(lái)看看吧!血清(Serum)即血液凝固析出的淡黃色透明液體將血液自血管內(nèi)抽出,放入試管中,不加抗凝劑,則凝血反應(yīng)被激活,血液迅速凝固,形成膠凍。在凝血過(guò)程中,纖維蛋白原轉(zhuǎn)變成纖維蛋白塊,血清中無(wú)纖維蛋白原,這一點(diǎn)是與血漿zui大的區(qū)別。在凝血反應(yīng)中,血小板釋放出許多物質(zhì),各凝血因子也都發(fā)生了變化。這些成分都留在血清中并繼續(xù)發(fā)生變化,如凝血酶原變成凝血酶,并隨血清存放時(shí)間逐漸減少以至消失。這些也都是與血漿區(qū)別之處。但大量未參加凝血反應(yīng)...
  • 細(xì)胞骨架的熒光探針標(biāo)記方法

    2016-08-11 細(xì)胞骨架主要有微管(micmtuble,MT),微絲(microfilament,MF),中間絲(intermediatefilament,IF三種類型。它們分別由不同的蛋白單體組裝而成,其中微管蛋白(tubulin)、肌動(dòng)蛋白(actin)、波形蛋白(vimentin)等是細(xì)胞骨架的重要組成部分,也是zui常被研究的細(xì)胞骨架蛋白。1963年.Slauterback采用戊二醛常溫固定方法.首先使用電鏡在水螅刺細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)了微管。隨后,微絲和中間絲相繼被發(fā)現(xiàn)。它們廣泛存在于真核細(xì)...
  • 細(xì)胞培養(yǎng)支原體污染來(lái)源/檢測(cè)/預(yù)防/去除

    2016-07-18 細(xì)胞培養(yǎng)支原體污染來(lái)源/檢測(cè)/預(yù)防/去除一、細(xì)胞培養(yǎng)支原體污染來(lái)源及主要支原體種類支原體(Mycoplasma)是一種大小介于細(xì)菌和病毒之間(0.1-0.6μm),沒(méi)有細(xì)胞壁、并獨(dú)立生活原核生物,形態(tài)呈高度多形性,呈圓形、絲狀或梨形。由于支原體直徑較小,進(jìn)行除菌過(guò)濾是,約1%的支原體可以直接穿過(guò)常規(guī)的0.22μm的微孔除菌濾膜,造成細(xì)胞的支原體污染。支原體污染的來(lái)源包括:(1)工作環(huán)境的污染,實(shí)驗(yàn)器材帶來(lái)的污染;(2)操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群);(3)已受...
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