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影響細(xì)胞培養(yǎng)的環(huán)境因素有哪些
2021-02-22 細(xì)胞培養(yǎng)（cellculture）是指在體外模擬體內(nèi)環(huán)境（無菌、適宜溫度、酸堿度和一定營養(yǎng)條件等），使之生存、生長、繁殖并維持主要結(jié)構(gòu)和功能的一種方法。細(xì)胞培養(yǎng)也叫細(xì)胞克隆技術(shù)，在生物學(xué)中的正規(guī)名詞為細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。不論對于整個生物工程技術(shù)，還是其中之一的生物克隆技術(shù)來說，細(xì)胞培養(yǎng)都是一個*的過程，細(xì)胞培養(yǎng)本身就是細(xì)胞的大規(guī)?？寺?。細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可以由一個細(xì)胞經(jīng)過大量培養(yǎng)成為簡單的單細(xì)胞或極少分化的多細(xì)胞，這是克隆技術(shù)*的環(huán)節(jié)，而且細(xì)胞培養(yǎng)本身就是細(xì)胞的克隆。細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是細(xì)胞生...
選用牛血清白蛋白BSA需要考慮哪些問題
2020-12-12 牛血清中的簡單蛋白，是血液的主要成分(38g/100ml)，分子量68kD。等電點4.8。含氮量16%，含糖量0.08%。僅含已糖和已糖胺，含脂量只有0.2%。白蛋白由581個氨基酸殘基組成，其中35個半胱氨酸組成17個二硫鍵，在肽鏈的第34位有一自由巰基。白蛋白可與多種陽離子、陰離子和其他小分子物質(zhì)結(jié)合。血液中的白蛋白主要起維持滲透壓作用、PH緩沖作用、載體作用和營養(yǎng)作用。在動物細(xì)胞無血清培養(yǎng)中，添加白蛋白可起到生理和機(jī)械保護(hù)作用和載體作用。牛血清白蛋白BSA，又稱第五組分...
關(guān)于牛血清白蛋白BSA的知識你了解多少
2020-12-10 牛血清白蛋白BSA，又稱第五組分，是牛血清中的一種球蛋白，包含583個氨基酸殘基，分子量為66.430kDa，等電點為4.7。牛血清白蛋白在生化實驗中有廣泛的應(yīng)用，例如在westernblot中作為Blockingagent。它是牛血清中的簡單蛋白，是血液的主要成分（38g/100ml），分子量68kD。等電點4.8。含氮量16%，含糖量0.08%。僅含已糖和已糖胺，含脂量只有0.2%。白蛋白由581個氨基酸殘基組成，其中35個半胱氨酸組成17個二硫鍵，在肽鏈的第34位有一自...
哪些因素影響了高保真DNA聚合酶的保真度？
2020-10-22 高保真DNA聚合酶的保真度是指準(zhǔn)確復(fù)制目的模板的結(jié)果。具體來說，這涉及到多個步驟，包括讀取模板鏈，選擇正確的三磷酸核苷，并將此核苷酸插入3’引物末端的能力。為了區(qū)分正確和錯誤的核苷酸，一些DNA聚合酶具有3’到5’核酸外切酶活性。這種“校正”活性可切除不正確摻入的單核苷酸，并將其替換成正確的核苷酸。高保真PCR使用摻入錯誤率低且具有校正活性的DNA聚合酶，以保證目的DNA的忠實復(fù)制。在設(shè)計PCR實驗時，你首先要考慮你的應(yīng)用是否需要高保真聚合酶。如果實驗結(jié)果依賴于正確的DNA序...
如何儲存和解凍胎牛血清才不會使產(chǎn)品質(zhì)量受損?
2020-08-24 胎牛血清是一種性狀、外觀淺黃色澄清、無溶血、無異物稍粘稠液體。胎牛血清應(yīng)取自剖腹產(chǎn)的胎牛；新牛血清取自出生24小時之內(nèi)的新生牛；小牛血清取自出生10－30天的小牛。血清是細(xì)胞培養(yǎng)中用量大的天然培養(yǎng)基，含有豐富的細(xì)胞生長必須的營養(yǎng)成份，常用于動物細(xì)胞的體外培養(yǎng)，具有極為重要的功能。如何儲存和解凍胎牛血清才不會使產(chǎn)品質(zhì)量受損?將血清從冷凍箱取出后，先置于2～8℃冰箱使之融解，然后在室溫下使之全融。但必須注意的是，融解過程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。長時間儲存在2-8℃時，血清中的各種蛋...
溶酶體染色試劑盒是一類熒光成像工具
2020-06-27 溶酶體染色試劑盒對于懸浮細(xì)胞，取10～60萬細(xì)胞，重懸于0.5mL細(xì)胞培養(yǎng)液中，細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅加入0.5mLJC-1染色工作液，顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中37℃孵育20分鐘。在孵育期間，按照每1mLJC-1染色緩沖液（5×）加入4mL蒸餾水的比例，配制適量的JC-1染色緩沖液（1×），并放置于冰浴。37℃孵育結(jié)束后，600g4℃離心3～4分鐘，沉淀細(xì)胞。棄上清，注意盡量不要吸除細(xì)胞。溶酶體染色試劑盒是一類熒光成像工具，用來標(biāo)記亞細(xì)胞，細(xì)胞器；例如細(xì)胞膜、溶酶體、...
細(xì)胞培養(yǎng)中馬血清的作用有哪些
2020-06-19 馬血清采自健康馬血液為原料，封閉系統(tǒng)內(nèi)無菌采血，微孔過濾而成，性狀為澄清液體，無噬菌體、超低內(nèi)毒素，無溶血無異物無細(xì)菌真菌支原體霉形體衣原體等，促細(xì)胞生長繁殖效果佳，適用于細(xì)胞、組織器官培養(yǎng)、細(xì)胞株保藏、單抗研制，是醫(yī)院、科研院校、動物疫苗、生物制藥廠家重要培養(yǎng)基之一。細(xì)胞在單純的培養(yǎng)基中不能存活，在特殊類型的細(xì)胞培養(yǎng)中必須提供某些營養(yǎng)物質(zhì)和生長因子才能是細(xì)胞得以生長并維持生長狀態(tài)?；A(chǔ)培養(yǎng)基常常要添加血清，血清終濃度多為5－20％。特殊用途的血清來源需用經(jīng)驗確定。廣泛應(yīng)用的...
說一說胎牛血清在細(xì)胞培養(yǎng)研究中的重要作用
2020-05-18 胎牛血清采用心臟封閉穿刺的方法采自孕6～8月孕齡的健康母牛腹中的胎牛。通過生物材料合成吸附技術(shù)和低溫進(jìn)行前期處理，去除細(xì)菌、病毒、支原體、抗體等影響血清質(zhì)量的因素，然后再在凈化車間中進(jìn)行過濾分裝。胎牛血清(FetalBovineSerum,FBS)是在屠宰懷孕母牛的時候,通過心臟穿刺采血獲取的胎牛的血清，新生牛(小牛)血清(Calfserum,CS)采自出生10至14天的小牛。要說為什么很多細(xì)胞培養(yǎng)的科研人都用到胎牛血清，那就不得不說說胎牛血清那極為重要的作用。1.提供維持細(xì)...

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